Slide 1: 2014年3月期 決算説明会
2014年3月期 決算説明会 ～人々の健康と豊かな暮らしのために～ http://www.transgenic.co.jp 2014年5月28日 株式会社トランスジェニック 注：当資料に記載された内容は、現時点において一般的に認識されている経済・社会等の情勢および当社が合理的と判断した経営計画に基づ き作成しておりますが、経営環境の変化等の事由により、予告なしに変更される可能性があります。また、今後の当社の経営成績及び 財政状態につきましては、市場の動向、新技術の開発及び競合他社の状況等により、大きく変動する可能性があります。
Slide 2: 目次
Table of Contents 目次 Ⅰ.2014年3月期 連結決算概要 Ⅱ.2015年3月期 連結業績予想 Ⅲ.中長期経営Vision Ⅳ.研究開発状況 Ⅴ.技術紹介 Ⅵ.研究トピックス Ⅶ.㈱ジェネティックラボ技術紹介 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 1
Slide 3: Ⅰ.2014年3月期 連結決算概要
Ⅰ.2014年3月期 連結決算概要 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 2
Slide 4: 2014年3月期連結決算：ハイライト
Overview of Consolidated Financial Results 2014年3月期連結決算：ハイライト 継続成長を支えるグループ骨格構築を今期は優先 Ｍ＆Ａ効果により売上高は2.3倍に拡大 営業損益及び経常損益は、買収後における一時的な管理費用増、買収調査等の 関連費用及び資金調達費用発生により損失幅が拡大 単位：千円 2013年3月期 2014年3月期 増減額 売上高 704,067 1,617,572 913,505 売上原価 430,584 1,106,149 675,565 売上総利益 273,482 511,422 237,940 販管費 309,893
Slide 5: 過去5年間の売上高推移
Overview of Consolidated Financial Results 過去5年間の売上高推移 ジェノミクス事業 抗体試薬事業 1,617 CRO事業 病理診断事業 250 ※病理診断事業はH26.8より開始 ※2010年売上高から食品売上を除外 各事業部門の強化・ 2.3倍 312 新規事業開発推進により （百万円） これまで、毎期20% 以上の売上成長を実現 704 607 668 今期はM&A効果により 202 509 207 売上高は2.3倍に拡大 382 202 180 150 147 306 321 385 232 252 2010 2011 2012 2013 20
Slide 6: 過去5年間の営業損益推移
Overview of Consolidated Financial Results 過去5年間の営業損益推移 125 136 19 営業損失拡大は、 事業部損益推移 83 69 43 55 一時的な要因であり 8 赤字転落 29 19 74 77 トレンドに変化はない 51 54 53 -3 -15 ▲47 （事業部損益概況） -98 ジェノミクス事業 CRO事業 全体損益は売上拡大に伴い順調に拡大 ※病理診断は CRO事業は前期黒字から当期赤字に転落 抗体試薬事業 病理診断事業 H26.8より開始 要因①：神戸研究所事業の不調（受注獲得時期の （百万円） 2010 2011 201
Slide 7: 2014年3月期連結決算：経常損益・当期純損益
Overview of Consolidated Financial Results 2014年3月期連結決算：経常損益・当期純損益 経常損益（百万円） 当期純損益（百万円） 営業損失拡大及び、資金調達・M&A 経常損失拡大、及び一時損失の増加に 関連費用負担により経常損失が拡大 より当期純損失が拡大 2013 2013 2014 0 ＋27 2014 0 ▲31 ▲91 経常損失幅拡大 ▲49 営業損失幅拡大 ▲140 ▲91 ▲113 ▲25 資金調達費用 特別損失（減損損失、 ▲23 投資有価証券評価損） 拡大 ▲12 買収関連費用 ▲17 特別利益（投資有価証 ▲5 その他 券売却益等
Slide 8: セグメント別業績概要：ジェノミクス事業
Overview of Sales Revenue - Genomics Business セグメント別業績概要：ジェノミクス事業 ジェノミクス事業 遺伝子改変マウス作製受託が順調に推移したことに加え、子会社化したジェネ ティックラボの遺伝子解析事業売上合算により増収増益 売上高 営業利益 74 77 385 13 321 70 300 105 43 60 53 300 252 50 250 40 79 64 200 280 30 150 278 20 100 10 50 0 ▲5 -10 2012 2013 2014 2012 2013 2014 遺伝子破壊マウス事業 遺伝子解析事業：来期に
Slide 9: セグメント別業績概要：CRO事業
Overview of Sales Revenue -Contract Research Organization Business セグメント別業績概要：CRO事業 CRO事業 新薬リサーチセンター売上合算により売上高は大幅増加。損益については当社 CRO事業の不振及び事業譲り受けに係る各種作業に時間を要し当期は赤字 売上高 営業損益 670 700 15 10 8 600 500 5 400 0 300 -5 ▲3 180 200 147 -10 100 -15 ▲15 2012 2013 2014 2012 2013 2014 ※新薬リサーチセンターの今期業績貢献は11ヵ月。当期業績は売
Slide 10: セグメント別業績概要：抗体試薬事業
Overview of Sales Revenue -Antibody and Reagent Business セグメント別業績概要：抗体試薬事業 抗体試薬事業 子会社化したジェネティックラボ子会社の先端医療開発事業売上合算により、 増収増益 売上高 営業利益 350 70 312 300 60 55 250 50 43 207 202 200 40 150 30 100 20 19 50 10 2012 2013 2014 2012 2013 2014 ※ジェネティックラボの今期業績貢献は8ヵ月。当期業績は売上高144百万円 Copyright© TransGenic Inc. All R
Slide 11: セグメント別業績概要：病理診断事業
Overview of Sales Revenue -Pathological Diagnostics Business セグメント別業績概要：病理診断事業 病理診断事業 ジェネティックラボ子会社化により病理診断サービスが新規事業として追加 売上高 営業利益 350 35 300 30 251 250 25 200 20 19 150 15 100 10 50 5 2012 2013 2014 2012 2013 2014 ※ジェネティックラボの今期業績貢献は8ヵ月 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 10
Slide 12: 新規連結子会社：新薬リサーチセンター
Overview of Financial Results –New Drug Research Center 新規連結子会社2社の業績概要：新薬リサーチセンター 当期は4月に事業譲受を行ったため実質的に11ヵ月の稼働 事業承継に係る手続きに時間を費消し、上期受注が伸び悩んだが 下期以降は回復 （業績推移 単位：千円） 2012年1月～ 2013年5月～ 当期は11ヵ月稼働のため、売上高は前年比9割 単位：千円 増減額 2012年12月 2014年3月 弱に留まるも、固定費削減をはじめとする経営 売上高 614,330 549,506 ▲64,824 効率化により黒字を確保 営業費用
Slide 13: 新規連結子会社：ジェネティックラボ
Overview of Financial Results –Genetic Lab 新規連結子会社2社の業績概要：ジェネティックラボ 当期は8月から業績を取り込んだため実質的に8ヵ月の稼働 財務体質の改善、経営効率化推進により収益性が大幅改善 （業績推移 単位：千円） 2013年8月～ 単位：千円 2013年7月期 増減額 2014年3月 当期は8ヵ月稼働のため、売上高は前年比7割5 売上高 614,334 458,886 ▲155,448 分弱に留まるも、固定費削減をはじめとする経 営効率化により黒字を確保 営業費用 664,959 438,805 ▲226,154 営業損益 ▲5
Slide 14: Ⅱ.2015年3月期連結業績予想
Ⅱ.2015年3月期連結業績予想 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 13
Slide 15: 2015年3月期 連結業績予想
Consolidated Business Forecast for the Year Ending March 2015 2015年3月期 連結業績予想 2015年3月期は業績が1年間フルに取り込まれるジェネティックラボとCRO事業 の復調により、売上高20億、営業、経常及び最終損益の黒字化を予想 2014年3月期 2015年3月期 単位：千円 増減 コメント （実績） （予想） 売上高 1,617,572 2,000,000 ＋382,428 遺伝子解析事業は先端医療事業へ移 ジェノミクス事業 385,162 280,000 ▲105,162 管 マウス事業は保守的に前期並を設定 下期より
Slide 16: 2015年3月期 連結業績予想（四半期推移）
Consolidated Business Forecast for the Year Ending March 2015 2015年3月期 連結業績予想 グループ損益構造は下期偏重型のため、四半期毎の業績は下記 のイメージで推移する。 単位：百万円 2,500 150 営業損益（四半期毎） 売上高（四半期毎） 営業損益（累計） 100 売上高（累計） 2,000 50 1,500 0 第１四半期 第２四半期 第３四半期 第４四半期 -50 1,000 -100 500 -150 0 -200 第１四半期 第２四半期 第３四半期 第４四半期 大学・公的研究機関案件は3月末納期が多く売上高は第4
Slide 17: Ⅲ.中長期経営Vision
Ⅲ.中長期経営Vision Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 16
Slide 18: 中長期経営Vision要約
中長期経営Vision要約 経営目標 長期経営Vision オンリー・ワンの創薬トータル支援企業 2020 中期経営Vision 長期経営Vision2020の経営基盤構築 2017 業績目標 長期経営Vision 2020 売上高40億円 営業利益10億円 中期経営Vision 2017 売上高25億円 営業利益2.5億円 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 17
Slide 19: 当社の現状及び過去5年間の総括
当社の現状及び過去5年間の総括 （百万円） 過去5年間の業績推移 連結売上高 1,619 営業利益 （百万円） 1,500 0 -36 1,000 704 -85 607 -100 -127 509 -133 500 382 -200 -293 10/3 11//3 12/3 13/3 14/3 -300 10/3 11/3 12/3 13/3 14/3 過去5年間の成果及び課題 成果 課題 ①領域の拡充 ①創薬トータル支援企業へ変貌 ・収支構造の強化（黒字化） ②規模の拡大 ②連結売上高は4倍強に拡大 ・各社潜在能力の顕在化 ③経営効率化 ③収益拡大で2億円強損益改善 ・グループ総合力の顕在
Slide 20: 長期経営Vision2020の概要
長期経営Vision2020の概要 長期基本方針 基礎研究から診断までの各領域に強みをもつオンリー・ワンの創薬トータル 支援企業を目指し、持続的成長を実現して企業価値向上を図る。 長期業績目標 長期基本戦略 ○連結売上高 40億円 ○事業戦略 ○連結営業利益 10億円 遺伝子から臨床試験までを網羅する創薬トータル支援事業の 展開 40億円 診断薬開発、個別化医療開発支援領域での事業化推進 長期経営Vision2020 海外展開 M＆A推進 25億円 ○組織戦略 事業戦略を支える組織体制の構築 中期経営Vision2017 グループ間シナジーを創出する弾力的組織構築
Slide 21: 中期経営Vision 概要
中期経営Vision 概要 基本方針 長期経営Vision2020達成に向けた 経営基盤構築のための基本戦略の推進 基本戦略 業績目標 (17年3月期) ○連結売上高 25 億円 ○事業方針 ・顧客の求めるベストソリューション提供のための、技 ○連結営業利益 2.5億円 術力・営業力の強化 連結売上高 連結営業利益 30 ・創薬トータル支援での収益モデルの確立 25億円 25 ・個別化医療に係る事業での成長戦略推進 22.3億円 20 20.0億円 ○組織改革 16.1億円 15 ・機動的グループ体制の構築（持株会社への移行開始） 10 ○投資計画 ・成長ドライバー創出のための研究開発推進、技
Slide 22: 基本戦略 －事業方針－ 創薬トータル支援
基本戦略 －事業方針－ ○強みを活かした創薬トータル支援での収益モデルの確立 標的分子 標的分子 リード探索 探索 の同定 と最適化 非臨床試験 臨床試験 医薬品 創薬プロセス ジェノミクス事業 CRO事業 ・疾患モデルマウス ・幅広い（小動物～大動物＋臨床）試験領域カバー ・遺伝子改変マウスの作製 ・GLP施設保有、及び海外CROとも提携 先端医療事業 先端医療事業 病理診断事業 ・遺伝子発現解析・タンパク質構造解析・PCR解析 ・臨床検体の増産・転座及び免疫染色試験・核酸解析 ・細胞の調整・増幅・転座及び免疫染色試験・核酸解析 ・ターゲット遺伝子・抗原の検出及び陽性細胞解析（FISH解析）
Slide 23: 基本戦略 －事業方針－ ジェノミクス事業の市場・成長性分析
基本戦略 －事業方針－ ○強みを活かした創薬トータル支援での収益モデルの確立 (強みであるジェノミクス事業の市場・成長性分析) 350 モデルマウスの充実 百万円 新しい研究支援ツール ジェノミクス事業の売上推移 300 遺伝子操作技術の発達 細胞ストレス 250 小胞体ストレス 酸化ストレス CRISPR/Cas9 200 を可視化する 受精卵から直接、 その他 TGマウス コンベンショナルKOマウス 150 非侵襲 作製受託 経時的 約半年で 完成 100 長期的 50 変異導入率 最大50％ 0 蓄積された信頼と実績 10/3 11/3 12/3 13/3 14/3 遺伝子破壊マウス作製
Slide 24: 基本戦略 －事業方針－ 個別化医療の市場・成長性分析
基本戦略 －事業方針－ ○個別化医療に係る事業での成長戦略推進（市場・成長性分析） 市場予測（領域別） （億ドル） 個別化医療に関連した世界市場は、 09年の120億ドルから2019年には450億ドル 市場は年率15.8％の拡大予想 南雲明、「薬物治療における個別化医療の現状と展望」（2013年3月） Jain, K.K.「Personalized Medicine-Scientific and Commercial Aspects-」 ・患者に適切な治療を提供する個別化医療は、分子標的薬という新しい薬剤の創薬手法とも重なり、医療の柱の一つとなる と考えられる。様々な面からベネフィットをもたら
Slide 25: グループ構成図
グループ構成図 （2014年4月1日現在） ジェノミクス 先端医療 事業本部 事業本部 ○遺伝子改変マウス作製 ○ﾓﾉｸﾛｰﾅﾙ抗体作製 2社については5月15日 ○ﾀﾝﾊﾟｸ質高発現細胞作製 に100%子会社化を目 ○ﾊﾞｲｵﾏｰｶｰ開発 的とする株式交換契約 ○遺伝子解析 を締結 持分法適用 連結子会社 関連会社 100% 100% 68.7% 88.5% 30.0% CRO事業 SMO事業 病理診断・先端医療事業 先端医療事業 先端医療事業 株式会社 株式会社 株式会社 株式会社 メディフォム 株式会社 プライミューン イムノキック 新薬リサーチセンター ジェネティックラボ ○医薬品、食
Slide 26: 基本戦略 －組織改革－
基本戦略 －組織改革－ 持株会社イメージ 純粋持株会社（HD) ジェノミクス CRO 先端医療 病理診断 XYZ 事業会社 事業会社 事業会社 事業会社 事業会社 (TG ジェノミクス事業部) (NDRC) (TG、GLab先端医療事業) (GLab 病理診断事業) (XYZ事業) タンパク質関連領域 遺伝子改変マウス領域 非臨床/臨床試験領域 病理診断領域 XYZ領域 遺伝子解析領域 強み 強み 強み 強み 強み ○成長性高い治験支援サービ ○専門病理医の高品質診断 ○過去4年平均成長率23% ○・・・・ ○小動物～大動物まで受託 ○豊富な受託実績 ○豊富な作製実績 ス（前年比40%強売上増
Slide 27: 基本戦略 －投資計画－
基本戦略 －投資計画－ ○事業区分と投資方針 事業区分 対象事業 投資方針 マウス作製受託 作製・飼育能力拡大を目的とする設備投資 設備投資 ジェノミクス事業 ヒト化マウス開発 事業化に向けて資源投入 研究開発 CRO事業 研究設備・機能の拡充 研究所機能の最適化・最大化 設備投資 バイオマーカー開発 有用シーズ導入に向けて資源投入 研究開発 先端医療事業 タンパク質関連 既存事業の基盤強化のためのM&A M&A 個別化医療支援 成長分野への資源投入 研究開発 病理診断事業 診断・検査事業 自動検査拡充・M&A M&A ○投入資源規模 研究開発 この３カ年は売上高比3~５％前後を毎期投入 M&
Slide 28: 事業別中期業績計画
事業別中期業績計画(2/2) ○ 2017年3月期の目標は売上高25億円（1.5倍）、営業利益2.5億（10％） ○ 売上高・営業利益を牽引するのはCRO事業および先端医療事業 ○ CRO事業を支えるジェノミクス・先端医療事業は高収益体質を確立 (億円) 事業別売上 15/3 16/3 17/3 ○ 連結売上高 25 億円 ジェノミクス事業 2.8 3.2 3.6 ○ 連結営業利益 2.5億円 CRO事業 8.2 9.0 10.0 先端医療事業 5.2 6.2 7.4 連結売上高 連結営業利益 診断事業 3.8 3.9 4.0 25億円 連結売上合計 20.0 22.3 25.0 22.3億円
Slide 29: 長期経営Vision2020と中期経営Vision2017の関係
長期経営Vision2020と中期経営Vision2017の関係 ・中期経営Vision2017はグループ事業・収益モデルの確立・強化が目標。 ・長期経営Vision2020は中期経営Vision2017の成果・路線を強化推進し、 Next Stage オンリー・ワンの創薬トータル支援企業グループとなることが目標。 売上高 課題・目標 オンリー・ワンの創薬トータル支援企業 長期経営Vision2020 （百万円） 成長要因 ヒト化マウス・バイオマーカー・M＆A 中期経営Vision2017 課題・目標 長期経営Vision2020の経営基盤構築 持続的成長・企業価値 拡大に向けて、 成長要因
Slide 30: Ⅳ.研究開発状況
Ⅳ.研究開発状況 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 29
Slide 31: 平成26年度 研究開発トピックス
Topics of Research & Development 平成26年度 研究開発トピックス ４月 「トラップマウス技術」に関する特許が中国にて成立 5月 メタボリックシンドロームマーカーに関する研究成果が『Cell Reports』に掲載 GANP®マウス技術に関する研究成果が『Nature Communications』に掲載 『病態可視化マウス』のパフォーマンスを更に向上させて提供開始 『Rosa26遺伝子を用いたKnock-inマウス』作製受託サービスを開始 6月 『ヒトAIM測定用ELISAキット』の発売 第13回日本蛋白質科学会に出展 9月 第86回日本生化学会 バイオインダ
Slide 32: 主要な特許の成立状況
Our Intellectual Property 主要な特許の成立状況 トラップマウス技術 『AU778719 』 オーストラリアにて成立 2005年4月 『US7,312,075 』 米国にて成立 2007年12月 『EP1201759』 欧州にて成立 2010年3月 『ZL00812904.5』 中国にて成立 2010年6月 『HK1048830B』 香港にて成立 2010年12月 『JP4664554』 日本にて成立 2011年2月 『ZL200510084464.6』中国にて成立 2013年4月 ＧＡＮＰ®マウス技術 『ZL2003801028324』中国にて成立 2008年7月 『
Slide 33: 開発パイプライン状況
Overview of Research & Development Pipeline 開発パイプライン状況 約3年 約2年 ライセンス ターゲット 抗体 有用性 測定系 アウト 上市 同定 作製 検証 構築 臨床開発 短期 抗体製品の開発 外部研究機関からの導入開発 上市に向け進行中 尿中がんマーカー 九州大学等 (国内診断薬メーカー） ※中国企業での臨床試験開始 ライセンス先交渉中 国立 追加データ蓄積中 膵がんマーカー がんセンター ※（株）免疫生物研究所と共同研究 測定キット販売中 ※中国企業と独占ライセンス契約締結 泌尿器がんマーカー 順天堂大学 測定キット販売中 ※中国企業とFS契
Slide 34: Ⅴ.技術紹介
Ⅴ.技術紹介 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 33
Slide 35: Rosa26遺伝子改変マウス作製受託
Technical Expertise Rosa26遺伝子改変マウス作製受託 平成26年5月よりサービス開始 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 34
Slide 36: Tgマウスに代わるRosa26遺伝子Knock-inマウス
Technical Expertise Tgマウスに代わるRosa26遺伝子Knock-inマウス トランスジェニックマウス トランスジェニックベクター （遺伝子を異所的に、過剰に発現させる） プロモータ発現させたい遺伝子 利点； • 発現させるベクターの構造が単純なので、比較的手軽に作成できる • 発現させる遺伝子の数 (コピーナンバー) が異なるものが得られる 欠点； • ゲノム上のどこに入るかわからない 入った場所によっては発現が抑制されてしまう マウス受精卵 想定される発現パターンが得られない場合がある 入った場所にある遺伝子を破壊してしまう可能性がある • コピーナンバーのコントロー
Slide 37: Rosa26遺伝子とは
Technical Expertise Rosa26遺伝子とは hPAP KI Phillipe Sorianoらによって、ROSA (Reverse Orientation Splice Acceptor) ベクターを用いたジーントラップ法で同定された遺伝子 座の一つ (Friedrich and Soriano, 1991) ROSA26遺伝子座へのノックインの利点 • Rosa26に導入された遺伝子はほぼ全ての細胞、組織で発現する • Rosa26遺伝子が破壊されても、マウス個体に異常を生じない GFP KI • 他の発現ユニットを挿入した場合に、その発現が抑制されることがなく、 想定さ
Slide 38: Rosa26遺伝子Knock-inマウスのデザイン
Technical Expertise Rosa26遺伝子Knock-inマウスのデザイン 発現させたい遺伝子 １．Rosa26 promoterよりの発現 全身での発現 GOI Rosa26 外来プロモータ promoter Exogenious promoter (組織特異的、過剰発現等） polyA polyA 1 SA GOI PGK-neo loxP(Creにより組換え) ２．外来promoterよりの発現 プロモータ特異的なパターンの発現 Rosa26 promoter polyA polyA polyA Exogenous 1 promoter GOI PGK-neo ３．Ros
Slide 39: Rosa26遺伝子Knock-inマウス作成受託サービス
Technical Expertise Rosa26遺伝子Knock-inマウス作成受託サービス Rosa26遺伝子Knock-inマウスに特化したサービス • ベクターバックボーンをあらかじめ準備することにより、ベクター構築を容易にした。 • 相同組換え頻度が高いため、ＥＳ細胞株樹立作業が軽減した。 標準的なノックインマウス作製 Rosa遺伝子改変マウス作製 工程名 標準価格 工程名 標準価格 １．相同組換えベクターの １．相同組換えベクターの 110万円 30万円 デザイン、構築 デザイン、構築 ２．組換えＥＳ細胞株の樹立 180万円 ２．組換えＥＳ細胞株の樹立 100万円 ３．キメラマウ
Slide 40: CRISPR/Cas9によるノックアウトマウス作製
Technical Expertise CRISPR/Cas9によるノックアウトマウス作製 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 39
Slide 41: CRISPR/Cas9法による遺伝子の切断
Technical Expertise CRISPR/Cas9法による遺伝子の切断 pX330 PciI BbsI BbsI XbaI AgeI NotI U6 target gRNA CBh Flag-NLS-hSpCas9-NLS pA ここにtarget配列を挿入(20bpでよい） 上記のベクターを受精卵に注入 mRNAの発現 Target配列を認識 Cas9がその部分を切断 DNA修復が起こる Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 40
Slide 42: ２本鎖切断の結果
Technical Expertise ２本鎖切断の結果 CTTGAGTCGAAG TAGCGATGACCT GAACTCAGCTTC ATCGCTACTGGA DNA２本鎖切断 Nonhomologous end-joing CTTGAGTCGAAG TAGCGATGACCT GAACTCAGCTTC ATCGCTACTGGA DNA修復過程で欠失や挿入が起こる⇒遺伝子破壊 vector 相同組換え CTTGAGTCGAAG TAGCGATGACCT GAACTCAGCTTC ATCGCTACTGGA 相同組換え CTTGAGTCGAAG TAGCGATGACCT GAACTCAGCTTC
Slide 43: CRISPR/Cas systemを利用したKO, KIマウスの作製
Technical Expertise CRISPR/Cas systemを利用したKO, KIマウスの作製 gRNA, Cas9発現ベクター H1 promoter CAG promoter ドナーＤＮＡ (KIの場合) gRNA Cas9 pA 変異導入頻度が高いため、 受精卵インジェクションで マウス受精卵 マウス受精卵 ノックアウト、ノックイン マウスが作製できる ノックアウトマウス ノックインマウス Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 42
Slide 44: CRISPR/Cas9によるKO, KIマウス作製サービス
Technical Expertise CRISPR/Cas9によるKO, KIマウス作製サービス CRISPR/Cas9によるノックアウト、ノックインマウス作製サービス ・受精卵でのノックアウト、ノックインマウスにより、期間短縮 ・薬剤耐性マーカーを必要とせず、１塩基置換のような微小変異を挿入可能 標準的なノックアウトマウス作製 CRISPR/Cas9によるマウス作製 工程名 期間 工程名 期間 １．相同組換えベクターの １．gRNAの設計 ２週間 ２ヶ月 デザイン、構築 ２．遺伝子特異的な ２．組換えＥＳ細胞株の樹立 1ヶ月 ２ヶ月 CRISPR/Cas9ベクターの構築 ３．標的配列の切断
Slide 45: VI. 研究トピックス
VI. 研究トピックス Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 44
Slide 46: 家族性アミロイドポリニューロパチー(FAP)
家族性アミロイドポリニューロパチー(FAP) 1. 常染色体優性遺伝病 2. 臨床症状 (1) 発症年齢: 20-45 years of age (2) 主症状：末梢及び自律神経障害 (3) 予後: 発症後１０−２０年で死亡 3. 病因 Mutant Transthyretin Amyloid 沈着 (例：TTR Val30Met) 他の要因 4. 有効な治療法：肝臓移植 より簡便な治療法の開発が急務 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 45
Slide 47: Neglected disease
家族性アミロイドポリニューロパチー(FAP) 日本での患者数：約1,000人 研究者も製薬企業も興味を持たない Neglected disease 大学等の研究機関が主となり 研究と治療法の開発を行う必要がある Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 46
Slide 48: 従来のマウスモデルの問題点
従来のマウスモデルの問題点 マウスTtr遺伝子が残存 マウスTTRはヒトTTRと雑種４量体を形成 雑種４量体は、ヒトのホモ４量体よりも安定 アミロイド沈着が起こりにくい マウスモデルでの病態はヒトを反映しない 理想的なモデルではない 治療法の開発には適さない Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 47
Slide 49: マウスTtr遺伝子座のヒト化マウス
マウスTtr遺伝子座のヒト化マウス Chr.19 野生型アレル 1 2 3 ATG PGK-neo pA 2 3 MC1-DT-A-PA 相同組換えベクター lox71 loxP ノックアウトアレル PGK-neo pA 2 3 lox6 loxP 6 hTTRVal30 cDNA pA 置換ベクター PGK-puro Frt Frt Cre reconbinase lox71/66 野生ヒト化アレル hTTRVal30 cDNA pA PGK-puro pA 2 FRT FRT 変異ヒト化アレル hTTRVal30Met cDNA pA PGK-puro pA 2 ヒトと同様ヘテロ接合体が作
Slide 50: 血中でのヒトTTRタンパク量
血中でのヒトTTRタンパク量 Ttr+/+ Ttr +/ hTTR TtrhTTR/hTTR hTTR 15KDa mTTR 14KDa albumin ところが、血中のhTTR量は、ホモのほうが低い!!! in vivo解析の重要性を示唆!!! ヒトTTRの4量体は不安定 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 49
Slide 51: TTRとRBPの結合部位
TTRとRBPの結合部位 TTR Ile84 176-183 RBP4 60-70 63-64 92-98 33-36 20-21 83-85 99-100 114 Human: A V R G LGISP NDSG PYS TTR Mouse: A V R G LGISP NDSG PYS TTR分子の中で、RBPとの結合に関与するアミノ酸は、ヒトとマウスで同じ 35 67 89 91 99 176 183 Human: G L F N W D M K Y W G V A S F L Q K G G R S E R N L L RBP4 Mouse: G L F N W D M K Y W
Slide 52: ダブルヒト化マウスの作製
ダブルヒト化マウスの作製 TtrhTTR/hTTRV30M Rbp4hRBP4 TtrhTTR/hTTRV30M:Rbp4hRBP4/hRBP4 理想的なヒト疾患モデル １．病因・病態解析 ２．治療法の開発 ヒト化マウスは、治療法の開発に極めて重要 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 51
Slide 53: 状況の変化
状況の変化 薬剤ターゲットが Misfolded protein diseases 枯渇しつつある アルツハイマー病やFAP 希少疾患にも注目せざるを得ない状況 製薬企業からのモデルマウスの供給依頼が増えている 米国、イギリス、イタリア、スイス Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 52
Slide 54: Ⅶ. ㈱ジェネティックラボ技術紹介
Ⅶ. ㈱ジェネティックラボ技術紹介 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 53
Slide 55: グループ子会社；ジェネティックラボ
グループ子会社；ジェネティックラボ ㈱ジェネティックラボ • 2009.9.29 CAP (College of American Pathologists) 米国病理学会認定を取得 • 2012.11.19 ISO9001認証を取得 品質マネジメントシステムに基づく品質管理・品質保証施設 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 54
Slide 56: 個別化医療に向けた展開
個別化医療に向けた展開 病理事業本部 先端医療事業部 病理細診断事業 受託解析事業/研究開発事業 主要顧客 主要顧客 北海道全域の病院、クリニック、 ・製薬・食品・化粧品・機器メーカー 総合検査センター ・大学、大学病院・国立研究所 Phenotype Genotype 病理学 分子生物学 形態学 生化学 ・組織構造全体・細胞サイズ ・遺伝子変異・増幅/欠失/転座 ・細胞形状・核のサイズ ・遺伝子/タンパク質発現 ・核の形状・クロマチン構造 ・microRNA発現・DNAメチル化 個別化医療/コンパニオン診断 新しいバイオマーカー 臨床試験プロトコール化 Copyright© TransGen
Slide 57: 個別化医療とは
個別化医療とは 患者の生理的状態や疾患の状態などを考慮して、患者個々に治療法を設定する医療。 特に，ゲノムバイオマーカーを利用した遺伝子診断などに基づく治療の個別化に関して 使用されることが多いが，“年齢，性別，体重，腎機能などを考慮した薬物投与設計”も， 広い意味では個別化医療の一手法といえる。 ※薬学用語集より改変 http://www.jyi.org/features/ft.php?id=1047 http://pganddrugresponse.blogspot.com/2009/03/personalized-medicine-vs-genome-based.html 製薬企業はもは
Slide 58: 個別化医療でのバイオマーカー
個別化医療でのバイオマーカー HER2検査 乳がん※にHER2阻害剤のハーセプチンを投与する時に、病理 組織標本におけるHER2タンパク質発現をIHCで、HER2遺伝 子の増幅をFISHで確認する。（※転移性乳がん、術後補助化 学療法） EGFR検査 肺がん※にEGFR阻害剤であるGefitinib（Iressa®)を投与する 時に、腫瘍組織のEGFR遺伝子の変異（エクソン19、21）を 調べる。（※手術不能または再発非小細胞肺がん） KRAS検査 大腸がん※にEGFR阻害剤であるCetuximab（Erbitax®）を 投与する時に、腫瘍組織のKRAS遺伝子の変異（コドン2,13） を調べる
Slide 59: バイオマーカーの測定評価
バイオマーカーの測定評価 血液（体液） ゲノムDNA ・染色体転座による 遺伝子融合 ・遺伝子増幅 低侵襲検査 ・Circulating Tumor DNA mRNA microRNA ・Oncogenic miRNAs 病理サンプル ・Tumor suppressor miRNAs 手術摘出組織 生検組織 病理診断 血中サイトカイン パラフィンブ タンパク質リン酸化 ロック・切片 血中循環がん細胞CTC ・phenotype ・genotype 凍結組織・切片 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 58
Slide 60: Powerful Discovery Platform
Powerful Discovery Platform ZEISS LCM PALM MBIII qRT-PCR ABI 7900-HT Fluidigm® BIOMARK 高精度の サンプリング 網羅的 ゲノミクス解析 遺伝子発現定量 ジェノタイピング HistoRx 核酸コピー数定量 in situ AQUA® technology バイオマーカー 定量解析 血中循環 タンパク質発現量 腫瘍細胞の測定 ・リン酸化測定 xMAP Technology Veridex (Suspended Array) Cell Search® System Luminex® System Genetix A
Slide 61: 超微量組織・細胞の採取ツール
超微量組織・細胞の採取ツール Laser Captured Microdissection (LCM) FFPE切片 凍結切片 細胞診（スメア）標本 病理医による領域指定 ・体細胞変異解析 ・高精度発現定量 ・網羅的発現 ・LOH検出 ・コピー数解析 ・染色体コピー数解析 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 60
Slide 62: 網羅的ゲノミクス解析
網羅的ゲノミクス解析 Affymetrix GeneChip® Expression Array -網羅的遺伝子発現解析 Gene Array -全転写産物での遺伝子発現解析 Exon Array -エクソンレベルの発現解析 miRNA Array -ヒト（microRNA 874種, snoRNA 900種, scaRNA 22種） -マウス（609種） ・ラット（351種） Genome-Wide Human SNP Array6.0 (900Ｋ SNPs) CytoScan HD （2,700Ｋ、2.7Ｍ） 癌化によるCopyNumberの変化を全ゲノムにわたり解析 - 非多型マーカー（
Slide 63: ハイスループット高感度遺伝子発現解析
ハイスループット高感度遺伝子発現解析 BioMark® ダイナミックアレイ ・96サンプル × 96ターゲット（約9,000反応/回・チップ） ・シングルセル解析（96細胞 × 96遺伝子） デジタルアレイ ・超高感度の絶対定量 ・12 or 48サンプル/チップ ・超微量サンプル中の遺伝子のコピー数を絶対定量可能 ・解析例 血液中の核酸 （母体血の胎児由来DNA、血中循環腫瘍DNA） 1細胞の転写産物のコピー数を測定 LCMで回収した組織や細胞の解析 Pipette Load Cycle & Scan Analyze Copyright© TransGenic Inc. All
Slide 64: 組織アレイの構築
組織アレイの構築 患者のがん組織など 事前に病理医がHE標本 を確認して位置決め Donor Blockからコアくりぬき(φ0.6-3mm) ティシューマイクロアレイヤー 多くの患者から集めて ・・・・ 溶解パラフィン 一枚のスライドに搭載 パラフィン包埋カセット TMAブロック TMAスライド →一度に多くの患者の発現レベルや薬効を観察することができ効率化を図ることが可能となる Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 63
Slide 65: セルブロックアレイ
セルブロックアレイ がんなどの培養細胞をホルマリンで固定した後、パラフィンで包埋した組織アレイと同様 に複数の細胞株を一枚に搭載した切片 細胞株はターゲットタンパクの発現や遺伝子発現、ゲノム構造が既知であることから、 ↓ ・免疫染色(IHC)や蛍光 in situ ハイブリダイゼーション(FISH)検出のコントロール切片と して活用 ・探索研究のツールとしても使用可能 パラフィンブロック IF-IHC DAB-IHC FISH 薄切 HE staining DNA extraction→genetic セルブロック標本 analysis Copyright© TransGenic Inc. A
Slide 66: 染色画像の客観的評価法
染色画像の客観的評価法 ◉ 従来の免疫染色（DAB発色）による自動スコア化 免疫染色→ 目視では客観的判断が困難な場合 FISH↓ 遺伝子の増幅・欠失をスコアリング化 染色強度を判定（0～3+） ◉ 自動定量解析 AQUA解析 蛍光多重蛍光免疫染色により シグナル値を定量 連続的・客観的に定量、数値データを取得し、 統計解析やクラスタリング解析などに利用 Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 65
Slide 67: タンパク質の定量解析
タンパク質の定量解析 Luminex® マルチプレックスアッセイシステム 血液・体液サンプル、培養上清、組織・細胞ライセート中の 多項目タンパク質濃度の同時解析 Luminex® System xMAP Technology (Suspended Array) Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 66
Slide 68: 血中循環腫瘍細胞の算定
血中循環腫瘍細胞の算定 採血 血液からCTCの分離 磁性抗体とMagNest 蛍光免疫染色と濃縮 で細胞の二次元化 CellSave検体保存管 採血から72時間以内 15-25℃で保存・輸送 CellTracks® Autoprep® System 目視による画像の判定（CTCの同定） 蛍光染色した細胞の画像撮影と分析 結果： CTC数 / 7.5mＬ CellTracks® Analyzer® II Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 67
Slide 69: 個別化医療に向けた創薬支援サービス
個別化医療に向けた創薬支援サービス 探索研究 非臨床試験 臨床試験 治療 ヒト CDx 動物モデル バイオマーカー PhDx 候補薬剤 血液サンプル 動物サンプル 測定評価 臨床検査 病理組織 ・PDバイオマーカー 診断薬 細胞 異種移植モデル 試験 機器への ・患者層別化因子 適用 バイオマーカー ・治療効果予測因子 グループの有する技術を結集することで、 さらに個別化医療に向けた 上流から下流まで創薬支援を可能とします Copyright© TransGenic Inc. All Rights Reserved. 68
Slide 70: 人々の健康と豊かな暮らしのために
～人々の健康と豊かな暮らしのために～ http://www.transgenic.co.jp